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发酵工程培养基有哪些

发酵工程培养基主要使用发酵培养基：发酵培养基是指为了在生产中更加利于菌种代谢产物的生成而设计的培养基，这类培养基常见的主要有以下几种：SOB（SuperOptimalBroth）培养基：是一种富营养培养基，其配方为：2%胰蛋白胨,0.5%酵母提取物,10mMNaCl,2.5mMKCl,10mMMgCl2,10mMMgSO4。与LB培养基相比，SOB培养基中含有两倍多的蛋白胨，富含更多的氨基酸及多肽。此外，SOB培养基中含有镁离子，镁离子是高密度培养必须的离子。利用SOB培养基...

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流式细胞技术介绍

流式细胞技术是一项广为使用、基于激光的生物学技术，利用流式细胞仪对处于快速流动的荧光染色的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选，是当代主要的细胞定量分析技术之一。主要有以下几个特点：1.只要样本制成单个细胞或生物颗粒悬液均可以分析。2.测量速度快，每秒钟可以测量数千个乃至数万个细胞3.同时测量每个细胞的多参数特征。4.在进行细胞特征分析的同时可以把有特征细胞分离出来(分选技术)关于流式细胞仪流式细胞仪由三部分构成——1.液流系统，包括流动室和液流驱动系统；2.光学系...

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Transwell实验的步骤

本文主要介绍4种Transwell实验的实验步骤，具体包括：Transwell肿瘤细胞迁移实验、Transwell上皮细胞培养实验、TranswellB16细胞的体外迁移实验、Transwell内皮细胞HMEC-1迁移实验。一、Transwell肿瘤细胞迁移实验过程与Transwell侵袭实验基本一致，不同的只是不需要铺Matrigel。由于没有基质胶的阻挡，细胞穿过膜的速度较侵袭实验明显加快，所以细胞量要更大。我做侵袭实验的细胞密度是1×10°，而迁移实验的密度是1×10°...

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重组蛋白表达技术要点

大肠杆菌（E.coli）表达重组蛋白的技术经过多年的发展，已经成为一个非常成熟表达系统。为了在大肠杆菌表达体系中获得可溶以高表达产量的蛋白，一个优秀的表达策略是重要的。为了高效表达有活性蛋白，一般需考虑以下几个因素：1.宿主体系的选择细菌、酵母、哺乳动物细胞、丝状真菌和单细胞藻类均可以作为表达宿主，每一种表达宿主都有各自的优缺点。如果需要表达的蛋白具有真核的翻译后修饰（糖基化修饰），那么可以选择酵母、哺乳动物细胞等，而大肠杆菌等原核表达体系则不适用。大肠杆菌作为表达外源蛋白广...

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凝胶电泳的染色方法

凝胶电泳是研究蛋白质性质的一种相对简单、快速和高灵敏度的工具。它是分析化学、生物化学和分子生物学的主要工具。通过电泳分离蛋白质是基于这样一个事实，即带电分子将在施加电场时通过基质迁移。蛋白质电泳分离的基质是聚丙烯酰胺。用于形成聚丙烯酰胺的化学试剂是单体丙烯酰胺和N，N'-双丙烯酰胺（双-丙烯酰胺）。聚合丙烯酰胺和双丙烯酰的方法是使用TEMED（四*基乙二胺）和过硫酸铵。聚丙烯酰胺凝胶内部的聚合形成了一个交联的微孔网络。这种孔隙网络允许小蛋白质分子快速通过，同时减缓较大蛋白质的...

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