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2023-329
hTERT成纤维细胞为永生化子宫内膜成纤维细胞(THESC)具有延长的寿命，并且在核型、形态和表型方面与原代亲代细胞相似。在功能上，THESCs显示激素治疗后蜕膜化的生化终点。THESCs来源于从患有肌瘤的成年女性身上获得的基质细胞。原代基质子宫内膜细胞通过用来自包装细胞系pA317-hTERT的上清液感染而永生化，该细胞系表达hTERT和嘌呤霉素抗性基因。hTERT成纤维细胞培养方案如下：一、所需材料Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)/F12(Sigma,D2...
查看更多2023-329
在细胞上做基因研究的一般的过程就是：利用CRISPR-Cas9先做基因除(GeneKnockout)，获得基因敲除细胞系纯合细胞：然后分析相关的生物学表型；最后做为对照还需要将原敲除的基因回补会到原细胞系中，做为对照细胞进行实验对比。而利用Cas9进行细胞敲除之后，细胞回补实验室要注意哪些问题?特别需要考虑的技术原理是那些？如何规划好实验流程，下面我们就一步步的进一下细胞其因敲除和回补实验的效率/价格/周期等。一、敲除细胞的方式一般都是纯合基因敲除细胞，当然也可以选择MixC...
查看更多2023-328
细胞培养基pH值对细胞的影响培养基是用来供给细胞营养，促使细胞增殖的，也是细胞赖以生长的环境。细胞培养实验中用量最多的就是细胞培养基，虽然细胞培养试验基本技术大同小异，但是每种细胞的培养条件却相差甚远。若偏离某种细胞所需的培养条件，则会导致细胞表达不同的表型。一、培养基体系主要成分及功能介绍1、葡萄糖：用于细胞能量代谢。2、CO?：细胞需要少量的二氧化碳来维持生长。在培养基中，溶解的CO?与碳酸氢盐离子处于平衡状态，许多培养基利用了这种CO?/碳酸氢盐反应来缓冲培养基的pH值...
查看更多2023-327
各种微生物由于遗传特性不同，因此适合采用的保藏方法也不一样。一种良好的有效保藏方法，首先应能保持原菌种的优良性状长期不变，同时还须考虑方法的通用性、操作的简便性和设备的普及性。下面介绍几种常用的菌种保藏方法：1.斜面低温保藏法将菌种接种在适宜的斜面培养基上，待菌种生长完成后，置于4℃左右的冰箱中保藏，每隔一定时间（保藏期）再转接至新的斜面培养基上，生长后继续保藏，如此连续不断。此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。放线...
查看更多2023-38
培养基作为细胞的“食物”，是细胞培养和发酵的基础，大肠杆菌在不同的培养基中培养可能会表现出不同的性状，而利用这些性状的不同，可将部分菌种进行区分或分离，此外，根据目标菌种选择合适的培养基可以低成本、稳定的高表达。大肠杆菌分离培养基常见的主要有以下几种：大肠杆菌分离培养基：主要根据不同的大肠杆菌在培养基中的生产速度，代谢产物，对培养基中特定组分的需求利用情况不同等实现对不同种类的菌种进行分离或筛选。LB固体培养基：是一种主要组分为酵母提取物、胰化蛋白胨、NaCl琼脂的非选择性固...
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